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离子交换柱的功能性解读
互联网2020-01-10

离子交换柱也称混床。离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。


带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。所谓的阴离子交换柱,就是把一定比例的阴离子交换树脂装填于同一交换装置中,对流体中的离子进行交换、脱除。


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离子交换柱(混床)的分类:混床按再生方式分可分为体内再生混床、体外再生混床、阴树脂外移再生混床三种。

(1)体外再生混床适合小流量、对环保有严格要求的企业。但由于体外再生式混床配套设备多,操作复杂,现在已很少使用。

(2)体内再生混床和阴树脂外移再生混床适合大流量,有专门的水处理操作人员及废水处理的场合。体内再生混床在运行及整个再生过程均在混床内进行,再生时树脂不移出设备以外,且阳、阴树脂同时再生,因此所需附属设备少,操作简便。

(3)阴树脂外移再生混床:阴树脂外移再生式混合床及其配套的阴树脂再生柱基本构造与小型逆流再生固定床大致相同,阴树脂再生柱厚度较混合床小,所需的膨胀高度为树脂层高度的50%~60%,故再生柱可较低,但一般为统一起见做成与混合床相同。


柱效损失的可能原因

1.额外的峰展宽。要保证管路的长度和内径都保持zui小。

2.洗脱的平衡时间不够。

3.不正确的洗脱液pH或洗脱液的离子强度。

4.洗脱液中存在不正确离子。

5.固定相污染。

a.高柱压伴随分辨率降低。

1.颗粒物积聚在烧结物或者填充物床上。

(a)样品来源---过滤或离心

(b)洗脱液来源---过滤洗脱液,封闭洗脱液容器。

(c)系统来源---冲洗整个系统管路和泵;安装在线系统过滤器。


2.蛋白质类物质的积聚:微生物在样品中生长。


3.微生物在洗脱液中生长。


b.正常柱压伴随柱效降低

有机污染

(a)样品中有脂肪,油脂,脂质。固定相的表面被覆盖。

(b)从样品中带来的不确切的有机物或未正确制备的洗脱液。

(c)在洗脱液制备完成以后带入洗脱液中的非特定有机物,例如在运输时从大气中带来。


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